一般BOD5（五日生化需氧量）常用的是稀釋法，將滿足上述條件的樣品分成兩份，一份測定當天的溶解氧質量濃度，另一份放入20攝氏度的培養(yǎng)箱內，培養(yǎng)5天后再檢測溶解氧的質量濃度。選擇原樣品或經適當稀釋的樣品進行測定，然后用適當的倍數進行稀釋。使培養(yǎng)瓶中有足夠的溶解氧以滿足五日生化的需氧要求。這兩種樣品的差就是五日生化需氧量。

  對于某些污染嚴重的地面水及大多數工業(yè)廢水、生活污水,因含較多的有機物,需要稀釋后再培養(yǎng)測定,以降低其濃度,保證生物降解過程在有足夠溶解氧的條件下進行。其具體水樣稀釋倍數可借助于高錳酸鉀指數或化學需氧量(COD)推算。

  對于不含或少含微生物的工業(yè)廢水,在測定BOD時應進行接種,以引人能分解廢水中有機物的微生物。當廢水中存在難于被一般生活污水中的微生物以正常速度降解的有機物或含有劇毒物質時,應接種經過馴化的微生物。

 BOD5的檢測步驟

稀釋法所用儀器和試劑

(1)恒溫生物培養(yǎng)箱,20L細口玻璃瓶,1000mL量筒,玻璃攪棒(棒長應比所用量筒高度長20cm,在棒的底端固定一個直徑比量筒直徑略小,并帶有幾個小孔的硬橡膠板),200~300mL溶解氧瓶,虹吸管(供分取水樣和添加稀釋水用)。

(2)磷酸鹽緩沖溶液將8.5g磷酸二氫鉀KH2PO4,21.75g磷酸氫二鉀K2HPO4,3.4g磷酸氫二鈉Na2HPO·7H2O和1.7g氯化銨NH4Cl溶于水中,稀釋至1000mL。此溶液的pH為7.2。

(3)硫酸鎂溶液將22.5g硫酸鎂MgSO4·7H2O溶于水中,稀釋至1000mL。

(4)氯化鈣溶液將27.5g無水氯化鈣溶于水,稀釋至1000mL。

(5)氯化鐵溶液將0.25g氯化鐵FeCl3·6H2O溶于水,稀釋至1000mL。

(6)稀釋水在20L玻璃瓶內裝入一定量的蒸餾水,每升蒸餾水中加入氯化鈣溶液、氯化鐵溶液、硫酸鎂溶液、磷酸鹽緩沖溶液各1mL,然后用無油空氣壓縮機或薄膜泵曝氣，使水中溶解氧含量達8~9mg/L時,停止曝氣,蓋嚴,使溶解氧穩(wěn)定。

如果工業(yè)廢水中含有有毒物質,缺乏微生物時,稀釋水中應加適量的經沉淀后的生活污水,作為微生物的接種,通常每升稀釋水接種2mL沉淀污水;或將馴化后的特種微生物引入水樣中進行接種。

(7)測定溶解氧的全部試劑。

 配制BOD5稀釋試劑

稀釋法檢測水中BOD5的操作步驟

1.稀釋水的檢驗

  用虹吸法吸取稀釋水(或接種稀釋水),注滿兩個溶解氧瓶,加塞,用水封口。其中一瓶立即測定其溶解氧,另一瓶置于恒溫生物培養(yǎng)箱內,在(20±1)℃培養(yǎng)5d后測定。要求溶解氧的減少量小于0.2~0.5mg/L。

2.稀釋倍數的確定

  地面水可由測得的高錳酸鹽指數乘以適當的系數求出稀釋倍數。

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